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| 出口肉及肉制品己烯雌酚残留量检验方法 |
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| 时间：2004-02-04 10:19:01.39 肉业行业网 |
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中华人民共和国进出口商品检验行业标准 中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出 口 肉 及 肉 制 品
中
己 烯 雌 酚 残 留 量 检 验 方 法 SN 0210—93
分 光 光 度 法
Method for
determination of diethylstilbestrol
residues in meat and meat products for
export
—Spectrophotometric
method
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1
主题内容与适用范围
本标准规定了出口肉及肉制品中己烯雌酚残留量检验的抽样、制样和分光光度
测定方法。
本标准适用于出口冻猪、牛、兔、鸡及午餐肉、清蒸猪肉和咸牛肉罐头中己烯
雌酚残留量的检验。
2
抽样和制样
2.1 检验批
以不超过2 500件为一检验批，同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标
记、产地、规格和等级等。
2.2
抽样数量
批量(件) 最低抽样数(件)
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500
15
501～1 000 17
1 001～2 500 20
2.3
抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。
肉及肉制品(罐头除外)：每件至少取一袋为原始样品，原始样品总量不少于2kg,
放入清洁容器内。加封后，标明标记，及时送实验室。
如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2
kg，则可用锋利刀(用酒精灭菌过)
在抽出的包件中，每件割取不少于100 g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混
合原始样的重量不少于2
kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。
罐头：每件随机取一罐。
所抽取的样品加封后，标明标记，及时送实验室。
2.4
试样制备
肉及肉制品(罐头除外)：从所取全部样品中取出有代表性样品约1 000
g，充分搅碎，
混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封并标明标记。
罐头：将所取全部样品开罐后，充分搅碎、混匀，取出约1000g，均分成两份，分
别装入洁净容器内，密封并标明标记。
2.5
试样保存
将试样于 -18℃冷冻保存。
注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3
测定方法
3.1 方法提要
用正己烷和氢氧化钠溶液依次提取试样中的己烯雌酚。取部分含己烯雌酚的氢氧化钠
溶液，用磷酸调至pH 为
8左右。加乙醇和水至一定体积。此澄清液在紫外灯下辐照，
使己烯雌酚转变为醌式的化合物，在波长418 nm测定吸收值，由标准曲线求得其含量。
3.2
试剂和材料
3.2.1 正己烷：分析纯。
3.2.2 磷酸：分析纯。
3.2.3 磷酸溶液：1＋4
3.2.4
氢氧化钠溶液：0.8mol/L.求出中和15 mL 0.8mol/L氢氧化钠溶液所需磷酸溶液
的毫升数，以酚酞为指示剂，至粉色刚刚消失。
3.2.5
乙醇：分析纯。
3.2.6 无水硫酸钠：分析纯，650℃灼烧4 h，于密闭容器内。
3.2.7 己烯雌酚标准品；纯度＞99％。
3.2.8
己烯雌酚标准储备溶液:准确称取己烯雌酚标准品25.0mg，加精制花生油至50.00g
(每毫克油中含己烯雌酚0.5μg)。
3.3
仪器和设备
3.3.1 紫外灯：15w。
3.3.2 分光光度计：具有10mm或40mm比色池(石英)。
3.3.3
组织捣碎机。
3.3.4 锥形瓶：250 mL，具磨石玻璃塞。
3.3.5 分液漏斗：250mL。
3.3.6
容量瓶：25mL，50mL。
3.3.7 试管：25 mL,具磨口玻璃塞和刻度。
3.4 测定步骤
3.4.1
标准曲线的绘制
准确称取己烯雌酚标准储备液 100.0 mg(含己烯雌酚50μg)于50mL烧杯中,
用50mL
正己烷定量转移至分液漏斗中。用氢氧化钠溶液20,20,10 mL
提取三次，合并氢氧化
钠溶液。
取氢氧化钠提取液0.5,1.0,2.0,5,5.0,7.5和10.0mL(分别含己烯雌酚0.5,1.0,5.0,
7.5和10.0
μg)分别置一组25mL试管中，用氢氧化钠溶液补足至15mL。按3.2.4
条事先
求出的毫升数加入磷酸溶液中和。再加乙醇2.5mL，最后用水稀释至25mL。
上述溶液每毫升含己烯雌酚分别为0.02,0.04,0.10,0.20,0.30,和0.40μg。
分别取适量上述溶液置于比色池中，按3.4.2条预先选好的辐照条件，在紫外灯下辐
照。在波长418
nm处测定其吸光度，以未辐照的溶液为参比液，按吸光度对浓度绘制标
准曲线。
3.4.2
辐照条件的选择(注意保护眼睛，勿直接接触紫外光线)
移取适当体积的绘制标准曲线用的溶液(0.40 μg/mL)放入比色池中，垂直放置
在距紫外灯约7
cm处，辐照10 min，在波长418 nm 处测定其吸光度，以未辐照的溶液
为参比液。然后每辐照1～2
min重复测定其吸光度。记录达到最大吸光度的辐照时间。
重复以上试验，或改变比色池和紫外灯的距离，直至找到最合适的条件，得出稳定的
并可以重复的最大吸光度(约为0.09)。记录辐照时间和距离，以后试验按此条件进行。
注：温度对辐照时间长短有一定影响，室温高辐照时间则短。
3.4.3
测定
称取试样5～15g(精确到0.1g)于100mL烧杯中，加20～50g无水硫酸钠，充分混匀，
定量转入锥形瓶中。加入正己烷100mL,强烈振摇2min，静置。取清液80mL(相当于4～12g
试样)，置分液漏斗中，加20mL氢氧化钠溶液，强烈振摇2min，静置分层(必要时可微热)。
取15
mL氢氧化钠溶液(相当于 3～9g试样)，置于试管中，按3.2.4条事先求出的毫升数
加入磷酸溶液中和。再加乙醇 2.5 mL
，最后用水稀释至25mL。以下按标准曲线绘制
3.4.1
条中“取适量上述溶液置于比色池中……，”。进行紫外辐照后，测定其吸光度。
3.5 空白试验
用15 mL 0.8
mol/L氢氧化钠溶液代替样品溶液，按3.4.3条测定步骤进行。
3.6
结果的计算和表述
按下式计算样品中己烯雌酚含量：
己烯雌酚(mg/kg)＝m1／m
式中：m1——按测得的吸光度从标准曲线上查得每毫升溶液中含有的己烯雌酚量，μg;
m——每毫升样液含有的试样量，g。
注：①计算结果需将空白值扣除。
②如样品中存在大量油脂时，需将油脂体积计算在正己烷提取液体积之内。
4
方法的测定低限、回收率
4.1 测定低限
本方法测定低限为0.05mg/kg。
4.2
回收率
回收率的实验数据：己烯雌酚添加浓度在0.05～1.20 mg/kg
范围内。回收率为
83.9％～90.0％。
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附加说明：
本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国天津进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人孙兆芬、宋金凤、张振祥、俞润民。
主要参考文献：
1.
AOAC-Official Methods of Analysis 39.018—39.021,14th Edition,1984.
2.
FDA-Animal Drug Analitical Manual,Feed
1—8,1985.
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中华人民共和国国家进出口商品检验局1993-06-04批准
1993-08-01 实施
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